txt♀cc具体而言，坚硬的基质促进EC增殖并可能导致血管完整性缺陷，这表明机械环境可能会影响肿瘤中的EC行为，从而影响抗VEGF的功效.本研究旨在阐明转移性血管生成是否受机械微环境的影响，机械微环境可以通过mCRC中转移相关的成纤维细胞（MAF）激活进行调节，以及是否可以改变这种MAF激活以提高抗血管生成治疗的疗效pytxt♀cc
1、CRC中的MAF高度激活
?在LM中观察到aSMA、p-MLC2和COL-I的显着更高表达，表明MAF的肌成纤维细胞和ECM重塑特征pytxt♀cc
?接下来，从CRC患者的pTU(CAF)和LM(MAF)中分离出原代成纤维细胞pytxt♀ccMAF显示出aSMA和p-MLC2的显着上调，证实了肌成纤维细胞和细胞收缩性信号的增加pytxt♀ccFAs的量化显示MAFs中FAs的平均面积更大（图L和M），支持CRCMAFs被高度激活pytxt♀cc
2、晚期CRC患者的ECM重构和硬化特征
?为了鉴定与肝转移相关的基因表达特征，我们对CRC患者的pTU和LM进行了RNA测序（RNA-seq）pytxt♀cc使用通路相互作用数据库(PID)对LM中上调基因进行的基因集分析(GSA)揭示了整合素信号传导的显着富集pytxt♀cc为了进一步表征成纤维细胞的基因表达，我们在成功富集后对分离的原代CAF和MAF进行了RNA-seqpytxt♀cc
?我们鉴定了3，721个差异表达的基因pytxt♀ccGO确定了MAF中上调的肌成纤维细胞/ECM重塑特征pytxt♀ccKEGG确定了ECM-受体相互作用和FA特征和PID确定了整合素信号（图H）pytxt♀cc此外，基因集富集分析(GSEA)还揭示了差异表达基因的肌动蛋白介导的细胞收缩、FA、ECM成分、肌生成和血管生成特征的强烈富集（图I-M）pytxt♀cc
3、MAFs增加微环境硬度，支持血管生成
?我们进行了凝胶重塑分析，并观察到MAF显示出更密集、更复杂的F-肌动蛋白网络（图A），并且可以比CAF更大程度地收缩凝胶（图B）pytxt♀cc在新鲜和冷冻保存的组织中，我们观察到LM的基质硬度显着增加（图C-D）pytxt♀cc基质硬度与来自同一患者的样本中的COL-I、aSMA和p-MLC2表达相关（图E-G）pytxt♀cc
?基质硬化调节EC增殖、血管生成、血管生长和分支，为了研究这种联